안녕하세요.
바이오앤드 입니다 !!
독일 anvajo 사에서 염색없이 세포수 측정이 정확하기 가능한 획기적인 Cell counter 인 fluidlab R-300을
소개드립니다.
Fluidlab R-300 은 작은 사이즈로 전원연결 없이 사용이 가능한 기존에 없는 획기적인 기술을 보유한
Cell counter & Spectrophotometer 입니다.
Fluidlab R-300 모델 Cell counter 는
어떠한 염색없이 완벽하게 Cell counting 측정이 되며, Live cell 과 Dead cell 의 생존율 (Viability) 측정도 기존의 염색을 처리하는 방식에 비하여 월등히 정확합니다.
그렇다면....
어떻게 염색없이도세포 측정이 가능할까요?
fluidlab R-300 은 Digital Holographic Microscopy (이하: DHM) 기술을 이용하여 세포배양 과정에서 Trypan Blue 시약으로 염색과정이 필요없이 세포 수 측정 및 생존률 확인이 빠르고 정확하게 가능합니다.
보통 광학현미경을 이용하는 제품들은 2차원적인 평면상의 사물을 보기 때문에 겹쳐있는 세포나 cluster 의 경우 정확하게 측정이 어려운 단점이 있습니다.
또한, Trypan Blue 염색의 경우는 염색약의 성분이 Live cell 에 demage 를 주기 때문에 Dead cell 로 시간이 지나면 변경이 되기 때문에 정확한 Viability 측정에도 한계가 있습니다.
하지만, Fluidlab R-300 은 광학현미경을 사용하지 않고 DHM 기술로 입체적인 홀로그램 (Hologram) 을 이용하여 세포의 입체 영상을 확인하는 방법으로 분석이 이루어 집니다.
세포의 입체적 이미지 (Holographic Image) 에는 세포 구조가 굴절률에 따라서 이미지로 표현되며, 세포의 외부형태와 세포질 구성에 따른 차이점에 대한 정보가 모두 포함되어 있습니다.
이런 DHM 이미지 기술을 이용하기 때문에 세포의 상태에 따라서 정확한 Live Cell 과 Dead Cell 의 구분이 가능하며, 완벽한 생존률 Viability 측정이 가능합니다.
What is a digital holographic microscopy ?
DHM 은 정확히 무엇인가요 ?
Digital Holographic Microscopy (DHM)은 세포 수 측정 및 생존율을 염색없이 측정을 하기 위한 최첨단의 기술입니다.
샘플로 빛을 비추게 되면 일부는 굴정이 되고, 일부는 굴절없이 그대로 통과합니다.
굴절 유무에 따라서 세포의 모양이 카메라에 입체 이미지 Hologram 을 만들게 됩니다.
LED 광원을 쏘게 되면
죽은 세포들은 투영이 되지 않으며
살아있는 세포들은 그대로 투명이 되어
세포들 주변으로 홀로그램을 만들고
투영되어 나온 빛들은 센서로 들어가게 됩니다.
What is the difference to " standard " brightfield microscopy ?
일반적으로 사용되는 광학현미경과는 어떤 차이가 있을까요?
광학 현미경의 경우에는 확인하고자 하는 표본의 빛을 흡수해서 렌즈를 이용하여 2D 의 이미지가 생성됩니다.
많은 생물학적 샘플의 경우에는 무색으로 빛을 흡수하는 양이 매우 적기 때문에 구별이 잘 되지 않습니다. 그래서 광학 현미경을 이용하는 경우에는 이를 구분 할 수 있도록 염색과정이 필요한 것 입니다.
반면에, Fluidlab R-300 은 렌즈를 전혀 사용하지 않고 DHM 기술을 도입하여 샘플의 굴절율 및 반사율을 이용하여 이미지가 생성되기 때문에 빛에 투영되는 세포의 생물학적 구조를 만들 수 있는는 것 입니다.
빛의 굴절율에 따른 세포막의 구조 및 세포질의 구성 양의 차이로 인하여 세포의 상태를 확인 할 수 있고 DHM 기술로 세포 주변에 가상의 홀로그램 링을 만들어 겹겹히 쌓여있는 세포들의 군집이라도 정확하게 링을 만들어 주어 별도의 염색없이도 세포의 정확한 구조 확인이 가능한 것 입니다.
따라서, 2D상의 평면이미지를 기준으로 측정되는 기존의 Cell Counting 방식보다 3D 입체영상으로 각 Layer 층에 겹겹히 존재하는 모든 세포들 모두 홀로그램을 만들어고 만들어진 갯수를 이미지 센서가 그대로 카운팅하여 정확한 값이 나올 수 있는 것 입니다.
이것이 Hologram (홀로그램)을 이용한 이미지가 광학 현미경을 기반으로 하는 제품들 보다 염색없이도 보다 정확한 결과 값을 얻는 이유입니다.
How can cell death be visualized with DHM ?
DHM 기술로 어떻게 죽은 세포를 확인 할 수 있는지요?
세포가 죽는 과정 혹은 세포자연사 (Apoptosis) 연구에서는 세포의 크기의 변화 또는 세포막의 변화로 인한 세포질의 양 변화 등 세포의 모양 변화가 일어나게 됩니다.
광학현미경을 이용하는 일반적인 in vitro 실험을 통해서 세포를 분석하는 방법의 경우에는 Trypan Blue 와 같은 염색 시료를 첨가하여 세포막이 정상적인 구조를 유지하고 있는지 확인 하는 방법으로 생존세포와 죽은 세포를 구별합니다.
하지만, 이런 염색을 이용하는 방법은 시약에 장기간 노출되면 세포가 독성에 노출이 되어 세포의 생존율에 영향을 미칠 수 있습니다.
반면에 DHM 을 이용하는 방법의 경우에는 염색을 할 필요없이 세포 사멸에 의한 형태적, 구조적 변화를 정확히 확인 할 수 있습니다.
Live Cell 은 어두운 윤곽으로 손상되지 않는 세포막을 확인 할 수 있으며, 세포질은 밝게 확인이 가능합니다.
Dead Cell 은 세포막 구조가 변형되어 세포질의 누출과 같은 변화로 인해서 세포가 전체적으로 어둡게 표현된 이미지를 확인 할 수 있으며, 세포막의 조각이나 핵과 같은 파편으로 확인 할 수 있습니다.
따라서, Fluidlab R-300 은 빛의 굴절율을 기반으로 세포사멸 동안 유도화된 형태학적 구조들을 각각 구별하여 R-300 의 시신경망 센서를 통해서 살아있는 세포만 물결모양의 링을 형상화하고 홀로그램으로 이미지 화 된 부분만 정확하게 측정을 하게 되고 분류를 하게 되는 것 입니다.
How does the fluidlab R-300 analyze cell viability ?
어떻게 세포의 생존율을 구분 할 수 있나요 ?
Fluidlab R-300 은 굴절율의 차이로 생성된 이미지를 이용하여 세포의 형태를 확인 할 수 있으며, 이를 기반으로 이미지 내의 모든 세포를 감지하고 카운팅 되도록 정교한 알고리즘의 DHM 센서를 탑재하고 있습니다.
또한, 모든 세포는 생존율을 결정하기 위한 과정을 거치며, DHM 을 통한 세포의 생존율은 세포막의 구조 뿐만 아니라 세포 내의 굴절율의 비례에 의하여 결정이 되어 집니다.
Live Cell 과 Dead Cell 을 구분하고 두가지로 구분된 값은 알고리즘을 통하여 각각의 수와 생존율의 비율로 결정되어 측정되어 집니다.
분석이 끝나면 세포가 살아 있는 비율이 확인되며, Viability 즉, 살아 있는 세포와 죽은 세포의 수가 수치로 표현 됩니다.
측정에 사용된 모든 세포에는 Live Cell 과 Dead Cell 을 확인 할 수 있도록 네모 박스가 형성이 되고, 살아 있는 세포는 연두색으로 죽은 세포는 주황색으로 표시가 되어 구분 되어 집니다.
그리프로 X축은 세포의 크기, Y축은 세포의 갯수를 확인 할 수 있으며, 이곳에서 색으로 구분되어 세포의 생존율을 바로 확인 할 수 있습니다.
세포의 크기를 나타내는 X축의 끝에는 2개의 세포 크기에 따른 조절 가능한 검은색 막대가 있으며, 특정 크기의 세포만 포함되도록 크기 범위를 좁히고 넓히게 조절이 가능합니다.
Fluidlab R-300 은 ...
Trypan Blue 염색이나 AO/PI 염색 없이 간편하게 Viability 측정과 Cell Counting 측정이 가능하고
핸드폰 처럼 전원연결선 없이 배터리 충전으로 공간의 제약없이 이동 사용이 가능합니다.
와이파이 / 핫스팟이 가능하여
공간의 제약없이 데이터를 외부로 편리하게 보낼 수 있습니다.
믿을 수 있는 독인 anvajo 사 제품으로
크린 벤치에서 바로 키운 세포들의 Cell Counting 이 가능합니다.
그리고 또하나 ....
Fluidlab R-300 은 큐벳 측정의 Spectrophotometer 기능도 가능합니다.
제품에 대하여 데모를 신청하시거나 견적을 원하시면
아래의 연락처 혹은 이메일로 문의를 주시면 감사하겠습니다.
이상 fluidlab R-300 에 대한 궁금한 점을 알려드렸습니다.
감사합니다 !!
https://www.bioand-anvajo.com/
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Hologram을 이용한 Trypan Blue 염색이 필요없는 휴대용 Cell Counter, 375nm ~ 700nm 측정이 가능한 Spectrophotometer 두가지 기능을 포함한 Anvajo만의 특허기술을 사용한 혁신적인 제품입니다.
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