실험장비 이야기/In Situ System

FISH (Fluorescence in situ hybridization) 이란?

(주)바이오앤드 2012. 10. 24. 14:11

FISH (FluoreScence in situ hybridization)이란, 염색체 상의 유전자를 검색할수 있는 방법으로 현재 유전자 지도 작성이나 유전체 해석 연구등에 사용되었던 기법으로 비 방사성 표지 유전자를 이용하기 때문에 안전하게 실험을 할수 있으며, 현재는 임상에서도 많이 사용을 하고 있는 염색 기법입니다.

 

 

 

옆의 그림에서 보는 바와 같이 FISH Staining은 염색체 표본에 염색을 해서 염색체를 형광으로 염색하여 표본을 확인하는 방법에 이용됩니다.

 

간단 실험설명)

 

ⓐ 염색체 표본을 Slide Glass에 올려 놓습니다.

 

ⓑ 준비한 Probe DNA를 표본이 있는 Slide Glass에 실험에 필요한

    시약들을 같이 첨가합니다. 

 

ⓒ Double Strand DNA를 Denaturation 과정을 통해 single

    strand DNA로 풀어줍니다. (이 과정으로 Sample DNA와 Probe

    DNA 모두 single strand DNA로 된다.)

 

Hybridization 과정을 통해 single strand로 변한 Probe DNA가

    Sample DNA와 결합을 시킵니다.

 

ⓔ 세정과정을 통해 Slide Glass에 남아 있는 결합이 되지 않은

     Probe DNA를 제거하고 난후 Probe DNA를 확인 할수 있는

     발광인자를 붙여줍니다.

    (그림 설명에서는 Probe DNA에 biotin을 접착시킨후, FITC 발광

     인자를 이용하여 signal 검출)

 

ⓕ 염색이 끝난 Slide Glass를 암실에서 형광 현미경으로 보면 확인

    하고자 하는 DNA가 보이게 됩니다.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

<Fluoresence in situ hyvridization 의 과정을 한눈에 보면 위와 같은 형태로 나오게 됩니다.>

 

<FISH Staining이 끝난후 현미경으로 표본을 관찰한 결과입니다.>

 

 

 

 

※ 추천 장비

 

 

 SLIDE DENATURATION / HYBRIDIZATION SYSTEM

 SLIDE GLASS INCUATOR

 TDH-500

 

 

 

 

in situ hybridization이나 fluorescence in situ hybridization (FISH)와 같은 실험은 Slide를 오랜시간 incubation을 해야하는 실험입니다. Protocol을 살펴봐도 손이 많이 갈 뿐만이나라 많은 시간이 소요되는 작업이기 때문에 TDH-500을 사용하시면 더 안전하고 좋은 결과의 실험 결과값을 얻어 내실 수 있습니다.

 

■ TDH-500의 장점 !!

 

 1. 12개의 slide glass를 한번에 실험을 할수 있기 대문에 한번에 여러개의 Sample을 이용하여 실험을 하실수 있습니다.

      ; 여기에서 12개의 Slide를 사용하여 실험을 할때, 가장 중요한 것은 12개의 Slide가 동일한 온도가 유지되냐는 것입니다. TDH-500은

        뚜껑을 닫았을때, 외부의 영향을 최소화 할수 있도록 만들어졌으며 온도 뿐만아리나 외부의 빛도 차단하여 암실효과를 줄수 있습니다.

 

 2. 자체 습도 조절 가능

      ; in situ bybridization 염색의 경우에는 대부분 오랜시간동안 sample을 incubation 해야 한다는 것이 가장 큰 문제입니다. Slide가 가열

        이 된다면 sample과 같이 들어간 시약등은 오랜시간 있으면 증발되어 마르거나 농도가 달라져 실험의 결과에 중요한 문제를 일으킬 수

        있습니다. TDH-500은 이러한 문제를 해결하기위해 incubator 내에 물탱크가 있어서 slide에 잇는 sample과 시약들이 최대한 마르지

        않도록 증발을 억제하는 효과를 냅니다.

 

 

   

 

 

 

 
 

 ⓐ Slide 넣는곳 옆에 물통을 꺼내 약 반정도

     멸균증류수로 채운다.

 ⓑ Incubation하고자 하는 Slide를 올려 놓기전에

     총 4개의 물통에 물을 채워 끼워 넣는다.

 

 

 

  3. 모든 기능을 터치스린으로 편리한 조작이 가능

     ; Color 터치 스크린이 장착되어 있어 모든 기능은 터치 기능으로 설정 및 작동이 가능하며, 터치팬이나 마우스를 기본으로 제공드려 제품

       의 사용이 아주 편리합니다.

 

  4. 기본 설정 기능(Denaturation & Hybridization, Hybridization, Custom 기능) 보유

     ; Denatureation 이나 hybridization 기능을 원하는 설정이 미리 설정되어 온도와 시간만 입력하면 되는 편리한 기능이 있습니다. 또한,

       패턴이 다른 설정도 Custom 기능을 통하여 다양하게 온도 및 시간을 설정이 가능합니다.

 

 

  5. 실시간으로 온도가 그래프로 표시되어 온도가 어떻게 변화하는지 확인 할수 있으며, 이를 이용하여 온도가 어떻게 변화하고

      있는지도 손쉽게 확인이 가능합니다.

 

 

■ Features

 

 1. User Programable Setting

   - 터치스크린 LCD 모니터를 통해 쉽게 설정이 가능하며 작동하기가 편리합니다.

   - 99개의 프로그램을 설정할 수 있습니다.

   - 작동에 필요한 3개의 옵션을 선택할 수 있습니다.

      ; Denaturation & Hybridization, Hybridization, Custom Temperature

   - Slide를 가열하여 Slide의 sample을 고정하는 용도로만으로도 활용이 가능합니다.

 

  2. Easy to Use

   - FISH (Flouroscene in situ hybridization) staining 시에 필요한 모든 과정을 손쉽게 진행을 할수 있습니다.

   - 12개의 Slide를 모두 올려 놓지 않아도 모두 온도가 일정하게 유지됩니다.

   - 빠르게 온도를 조절할 뿐만아니라 온도가 정확하게 유지됩니다.

 

  3. More strigent Temperature control

   - Ramp-up 속도가 매우 빠를 뿐만아니라 온도의 오차범위가 ±1℃로 매우 정확합니다.

   - 12개의 모든 Slide의 온도가 동일하게 조절됩니다.

   - Block과 lid에서 동시에 가열을 하여 온도 조절 및 유지 능력이 뛰어납니다.

 

  4. Ideal for humidity control

   - Block에서 가열하면서 lid에서 동시에 가열을 하기 때문에 더 정확한 온도를 유지 할 뿐만아니라 모든 slide간 온도를 일정하게 유지할 수

      있습니다.

 

■ Specifications

 

 1. 온도 조절 범위 : 상온 5℃ ~ 100℃

 2. 화면 온도 정확성 : ± 1℃

 3. 온도 정확성 : ± 1℃

 4. 시간 설정 범위 : 1분 ~ 99시간 59분

 5. 가열 시간 (37℃ ~ 95℃) : ≤3분

 6. 냉각 시간 (95℃ ~ 45℃) : ≤5분

 7. 조절가능한 프로그램 온도 : 30℃ ~ 100℃

 8. 수용량 : 12 slide

 9. 크기 : 420 x 225 x 143 cm

 10. 무게 : 6KG

 

 

 

 

 

 

 

 

  
 

 ① 터치스크린으로 편리한 설정 및 작동이 가능합니다.

 ② 12개의 Slide가 균일하게 온도가 조절됩니다.

 ③ Heating lid를 통해 균일하게 온도조절이 가능합니다.