안녕하세요 !!
바이오앤드 입니다.
최근 " 연세대학교 의과대학교 병리학실험실 연구소 " 에 납품설치를 진행드렸던 in Situ PCR 머신을 소개 해 드리겠습니다.
in Situ PCR 머신
모델 : A100
in Situ hybridization (ISH) PCR
fluorescence in situ hybridization (FISH) PCR
PCR 과정에서 in situ PCR 이라는 부분이 있습니다.
먼저 in situ 의 뜻을 알아야 하는데요, in situ 는 (현지내)를 뜻하며, ex situ 는 (현재외)를 지칭합니다.
일반적으로 생물학적 측면에서 생태복원연구시에 많이 사용되는 문구로 " in situ " 는 one pot reaction 이라고 표현하기도 합니다.
즉, " 한 용기내에서의 반응 " 이라는 뜻 입니다.
결국 in situ 는 실험기기가 같은 자리를 반복해서 움직이며 측정을 하고 한샘플 위에서 같은면을 관찰 할 때 쓰이는 용어입니다.
참고로, in vitro 와 in vivo 는 생물학에서 기내실험 혹은 체내실험인지를 구별하는 말을 뜻합니다.
그러면, in situ 에 관련하여 유전적인 발현여부에 대하여 여러가지 복잡한 과정이 필요한데요,
가령, in situ hybridization (ISH), chemogenic in situ hybridization (CISH), fluorescence in situ hybridization (FISH) 등등 다양한 과정의 Hybridiztion 이 필요합니다. 이는 특정한 위치의 target nucleic acid (표적핵산)에 tissue (조직)이나 cell (세포)를 붙이기 위한 과정으로 화학적방법으로 붙이는지, 형광물질로 붙이는지에 따라서 그 과정이 달라지는 것입니다.
결국 ' Blot Hybridizatio '을 통하여 nucleic acid probe를 합성시키거나 labeled (표시인자 붙이기), purified (정제), annealed (풀리게하기)의 과정을 하기 위해서 여러단계의 실험 중에 PCR (다중연쇄반응)이 필요한데요,
일반 PCR 과는 달리 Slide 위에서 tissue 나 cell 을 올리고 여러과정의 blot hybridization 을 하면서 PCR을 진행하는 부분을 in situ hybridization (ISH) 의 PCR 을 일반적으로 " in situ PCR " 이라고 합니다.
이렇게 Cell 이나 Tissue 를 사용하다 보니 Slide 를 사용하게 되는데요, 일반 튜브용기로 손쉽게 하던 PCR 과는 달리 전용 in situ PCR 블럭 혹은 모듈이 필요하게 됩니다.
일반적으로 0.2ml PCR Tube 96홀이 있는 튜브전용 블럭모듈에서 아래와 같은 in situ PCR 전용 Slide 거취가 가능한 블럭을 덮습니다.
완벽하게 튜브타입의 빈공간을 덮어주기 때문에 온도의 손실없이 정확하고 정교한 온도 전달 능력으로 Slide 전용의 블럭으로 in situ PCR을 수행하게 됩니다.
저희 바이오앤드의 경우는 현재 판매하고 있느 Thermal Cycler PCR 중에서
in situ PCR 을 사용할 수 있는 모델은 다음과 같습니다.
A100 일반형 A300 Gradient 형
A100 모델의 경우는 Gradient 기능은 없으며, 일반적인 PCR 머신입니다.
A300 모델은 Gradient 기능이 추가된 모델입니다.
현재 A200 모델은 단종되었습니다. 참조부탁드립니다 !!
이상 in situ PCR 에 대하여 알아보았습니다.
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감사합니다.
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